আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের রক্ষণাবেক্ষণ এবং ব্যবহার পদ্ধতি

আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের রক্ষণাবেক্ষণ এবং ব্যবহার পদ্ধতি

আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের কাজ:

1) ঘনত্ব; 2) ডিসল্টিং; 3) বাফার প্রতিস্থাপন; 4) এটি আংশিক পরিশোধন প্রভাব আছে.

1. নতুন আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউব অন্য চিকিত্সা ছাড়া সরাসরি ব্যবহার করা যেতে পারে;

2. আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউব উচ্চ তাপমাত্রায় জীবাণুমুক্ত করা যাবে না;

3. ঘনীভূত প্রোটিন পরিবর্তন করার সময় আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের চিকিত্সা

আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউব পুনরায় ব্যবহার করা যেতে পারে। এটিকে 0.1M NaOH-এ 1-2ঘন্টার জন্য ভিজিয়ে রাখুন, জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন, এবং তারপর সেন্ট্রিফিউজে প্রাসঙ্গিক দ্রবণ (জীবাণুমুক্ত জল বা পিবিএস) দিয়ে 3 বার ধুয়ে ফেলুন, যা ঘনীভূত করতে ব্যবহার করা যেতে পারে নতুন প্রোটিন;

4. সাধারণত স্থাপন করা আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের চিকিত্সা

প্রায়শই ব্যবহৃত আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের জন্য, এটিকে 0.1M NaOH-এ 1-2ঘন্টার জন্য ভিজিয়ে রাখুন, জল দিয়ে ধুয়ে জীবাণুমুক্ত জলে ভিজিয়ে রাখুন৷ ফিল্টার ঝিল্লি ভেজা রাখা এবং ব্যাকটেরিয়া বৃদ্ধি রোধ করতে ভুলবেন না;

5. একটি দীর্ঘ সময়ের জন্য স্থাপন করা ultrafiltration টিউব চিকিত্সা

যদি আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবটি দীর্ঘ সময়ের জন্য ব্যবহার না করা হয়, তাহলে এটিকে 0.1M NaOH-এ 1-2ঘন্টার জন্য ভিজিয়ে রাখুন, জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন এবং সংরক্ষণের জন্য 20 শতাংশ ইথানলে ভিজিয়ে রাখুন৷ ফিল্টার ঝিল্লি ভেজা রাখা এবং ব্যাকটেরিয়া বৃদ্ধি রোধ করতে ভুলবেন না;

6. আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের জন্য ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউগাল গতি

কেন্দ্রাতিগ গতি সাধারণত 4000rpm হয় (3000g সাধারণত সুপারিশ করা হয়, এবং সর্বাধিক 4000g অতিক্রম করতে পারে না)। 5-8 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে, 4ml নমুনাকে 1ml থেকে কয়েক ডজন মাইক্রোলিটারের কম ঘনীভূত করা যেতে পারে; গতি খুব বেশি হলে, লক্ষ্য প্রোটিন পড়ে যাবে, যার ফলে লক্ষ্য প্রোটিন নষ্ট হবে; কম গতি, সময় গ্রাসকারী এবং কম কাজের দক্ষতা;

7. বন্দুকের মাথা আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের মধ্যে প্রসারিত হলে সতর্কতা

আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবে প্রোটিন দ্রবণ বা বাফার যোগ করার সময়, নীল বন্দুকের মাথা ব্যবহার করা যেতে পারে; যাইহোক, যখন ঘনীভূত লক্ষ্য প্রোটিন আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের নিচ থেকে শোষিত হয়, তখন হলুদ বন্দুকের মাথা ব্যবহার করতে হবে; যখন বন্দুকের মাথাটি আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবে ঢোকানো হয়, তখন ফিল্টার ঝিল্লিতে ছিদ্র হওয়া এড়াতে ফিল্টার মেমব্রেনে স্পর্শ করা থেকে বিরত থাকতে হবে;

8. আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের প্রোটিন শোষণের ক্ষতি হ্রাস করুন

আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের ঝিল্লি প্রোটিন শোষণ করতে পারে, যা লক্ষ্য প্রোটিনকে প্রায় 30 শতাংশ কমিয়ে দেবে; প্রোটিনের ক্ষতি কমাতে, লক্ষ্য প্রোটিন দ্রবণ শোষণ করার পরে, ফিল্টার ঝিল্লি দ্বারা শোষিত বেশিরভাগ প্রোটিন ধুয়ে ফেলার জন্য প্রোটিন বাফার দিয়ে আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউবের নীচে পরিষ্কার করুন এবং লক্ষ্য প্রোটিনের ক্ষতি হ্রাস করুন; যদি বিশুদ্ধ প্রোটিন ঘনীভূত হয়, তবে মনোযোগ দিন যে ঘনীভূত ভলিউম খুব ছোট হওয়া উচিত নয়; সাধারণত, যতই সেন্ট্রিফিউজ করা হোক না কেন, প্রায় 200 µ L প্রোটিন দ্রবণ নীচে রাখা হবে;

9. কিভাবে ultrafiltration টিউবের ব্যর্থতা সংজ্ঞায়িত করা যায়

সাধারণ ব্যবহারের অধীনে, যখন ফিল্টার মেমব্রেনটি ছিদ্র করা হয় না, তখন ঘনীভূত প্রোটিন দ্রবণে প্রোটিন থাকে না বা পরিমাণ খুব কম থাকে (লক্ষ্য প্রোটিন সহ), যখন প্রথম ফিল্টার করা দ্রবণে লক্ষ্য প্রোটিন থাকে, এটি নির্দেশ করে যে ফিল্টার ঝিল্লিটি অবৈধ এবং একটি নতুন আল্ট্রাফিল্ট্রেশন টিউব দিয়ে প্রতিস্থাপন করা প্রয়োজন।