ভাইরাস জাতীয় কণা ভ্যাকসিন এবং এর ডাউন স্ট্রিম পরিশোধন প্রক্রিয়া

ভাইরাস জাতীয় কণা (ভিএলপি) ভ্যাকসিন একটি ভ্যাকসিন প্রযুক্তি যা ভাইরাস কাঠামোর উপর ভিত্তি করে তবে ভাইরাল জেনেটিক উপকরণগুলি ধারণ করে না। তারা প্রাকৃতিক ভাইরাসগুলির রূপচর্চা এবং পৃষ্ঠের অ্যান্টিজেনগুলি নকল করে একটি শক্তিশালী প্রতিরোধ ক্ষমতা জাগিয়ে তোলে এবং প্রতিলিপি করতে অক্ষমতার কারণে আরও বৃহত্তর সুরক্ষা সরবরাহ করে। ভিএলপি ভ্যাকসিনগুলি traditional তিহ্যবাহী ভ্যাকসিনগুলির একটি ভাল বিকল্প (লাইভ অ্যাটেনিউটেড এবং নিষ্ক্রিয়)। ভিএলপি ভ্যাকসিন শরীরে প্রতিলিপি তৈরি করতে পারে না, সুতরাং এটি গর্ভবতী মহিলা বা আপোসযুক্ত প্রতিরোধ ব্যবস্থা সহ প্রত্যেকের পক্ষে উপযুক্ত। এছাড়াও, ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাস, আফ্রিকান ঘোড়ার অসুস্থতা ভাইরাস এবং ব্লুয়েটং ভাইরাসগুলির মতো বিভাগযুক্ত জিনোম সহ ভাইরাস থেকে ক্যাপসিড প্রোটিনগুলি (অন্যান্য স্ট্রাকচারাল প্রোটিন সহ), জীবাণু পুনরায় ভ্যাকসিনের মতো জেনেটিক পুনঃনির্মাণ সম্পর্কিত বিষয়গুলি নিয়ে চিন্তা না করে ভিএলপি ভ্যাকসিনগুলি বিকাশ করতেও ব্যবহার করা যেতে পারে। দ্বিতীয়ত, ভিএলপিগুলি নিষ্ক্রিয় ভ্যাকসিনগুলির মতো নয়, যাদের কাঠামোগত প্রোটিনগুলি নিষ্ক্রিয়করণের সময় সংশোধন করা যেতে পারে, যার ফলে ইমিউনোজেনিক দুর্বলতা দেখা দেয়, এর বিপরীতে বাস্তব ভাইরাসগুলির কাঠামো নকল করতে সক্ষম হয়।

 

ডুমুর। 1। ভিএলপিএস এবং চিমেরিক ভিএলপিগুলির গঠন প্রক্রিয়া

 

ভিএলপি ভ্যাকসিনের বৈশিষ্ট্য

1। প্রাকৃতিক ভাইরাসের অনুরূপ কাঠামো: ভিএলপিগুলি ভাইরাল এক বা একাধিক কাঠামোগত প্রোটিন (যেমন ক্যাপসিড প্রোটিন) দ্বারা স্ব-একত্রিত হয় এবং তাদের আকার এবং আকারটি বাস্তব ভাইরাসের মতো।

2। অ-সংক্রামক: ভাইরাল জিনোম ধারণ করে না, রোগের প্রতিলিপি বা কারণ হতে পারে না।

3। উচ্চ ইমিউনোজেনসিটি: গ্রানুলার স্ট্রাকচারটি ইমিউন সিস্টেম দ্বারা দক্ষতার সাথে স্বীকৃত হতে পারে এবং বি সেল এবং টি কোষের প্রতিক্রিয়াগুলি সক্রিয় করতে পারে। অ্যান্টিবডিগুলি এবং সেলুলার অনাক্রম্যতা (যেমন, এইচআইভি, এইচপিভি ভ্যাকসিন) নিরপেক্ষকরণকে প্ররোচিত করতে পারে।

4। উচ্চ সুরক্ষা: কম প্রতিরোধ ক্ষমতা (যেমন হেপাটাইটিস বি ভিএলপি ভ্যাকসিন) সহ লোকদের জন্য উপযুক্ত।

 

ডুমুর। 2 উপলব্ধ ভিএলপি ভ্যাকসিন

 

ভিএলপি ভ্যাকসিন উত্পাদন ব্যবস্থা

ভিএলপিগুলি বিভিন্ন এক্সপ্রেশন সিস্টেমের মাধ্যমে উত্পাদিত হতে পারে, সাধারণ প্ল্যাটফর্মগুলির মধ্যে রয়েছে:

 

1। পোকামাকড় সেল-বেকুলোভাইরাস সিস্টেম:

সুবিধাগুলি: উচ্চ ফলন, স্বল্প ব্যয়, জটিল প্রোটিন সমাবেশের জন্য উপযুক্ত।

অ্যাপ্লিকেশন: এইচপিভি ভ্যাকসিন, ইবোলা ভ্যাকসিন।

 

2। স্তন্যপায়ী কোষ (যেমন HEK293 কোষ):

সুবিধাগুলি: অনুবাদ-পরবর্তী পরিবর্তনগুলি মানুষের নিকটবর্তী এবং খামে ভিএলপিগুলির জন্য উপযুক্ত (যেমন ফ্লু ভ্যাকসিন)।

 

3। খামির সিস্টেম (যেমন পিচিয়া পাস্তোরিস):

সুবিধা: দ্রুত, স্বল্প ব্যয়, হেপাটাইটিস বি ভ্যাকসিনে ব্যবহৃত হয়েছে।

 

4। উদ্ভিদ সিস্টেম (যেমন তামাক ক্লোরোপ্লাস্টস):

পরিবেশ বান্ধব এবং স্কেলযোগ্য, বিকাশের অধীনে (যেমন, নোরোভাইরাস ভিএলপি ভ্যাকসিন)।

 

ভিএলপি ভ্যাকসিনের ডাউনস্ট্রিম পরিশোধন প্রক্রিয়া

ভিএলপিএস এক্সপ্রেশন সিস্টেমের বৈচিত্র্য ডাউন স্ট্রিম শুদ্ধকরণ প্রক্রিয়াগুলির অন্তর্নিহিততার দিকে পরিচালিত করে।

 

 

ডুমুর। 3 একটি সাধারণ ডাউন স্ট্রিম প্রক্রিয়া প্রবাহ চার্ট

 

ফসল এবং স্পষ্টতা:

সমস্ত ধরণের সংস্কৃতি মাধ্যমের মধ্যে, কোষ সংস্কৃতি দ্বারা চালিত করে, প্রচুর পরিমাণে ভাইরাস কণা রয়েছে, পাশাপাশি অনেকগুলি কোষের টিস্যু ধ্বংসাবশেষ, বিপাকীয় পণ্য এবং অন্যান্য অমেধ্য রয়েছে, সংস্কৃতি মাঝারি মেঘলা বা আধা-ক্লাউড তৈরি করে, যদি সংস্কৃতি মাধ্যমকে সরাসরি মনোনিবেশ করা হয় তবে আল্ট্রাফিল্ট্রেশন ঝিল্লি অবরুদ্ধ করা হবে, ফলস্বরূপ এই ঘনত্বটি সম্পূর্ণ হতে পারে না। সুতরাং, সংস্কৃতি মাধ্যমের বৃহত কণাগুলি অপসারণ করার জন্য এটি অবশ্যই ঘনত্বের আগে প্রথমে স্পষ্ট করা উচিত, যাতে এটি একটি স্বচ্ছ বা স্বচ্ছ সমাধান হয়ে যায় এবং সংস্কৃতি মাধ্যমের ঘনত্ব ঘনত্ব প্রক্রিয়াটিকে স্বাভাবিক করে তুলতে পারে এবং আল্ট্রাফিল্ট্রেশন ঝিল্লির পরিষেবা জীবন নিশ্চিত করতে পারে। সংস্কৃতি সমাধানের ঘনত্বের আগে স্পষ্টকরণ ঘনত্বের প্রক্রিয়াতে একটি মূল প্রযুক্তিগত লিঙ্ক।

 

একটি দক্ষ স্পষ্টকরণ প্রক্রিয়াটির জন্য শক্ত কণাগুলি অপসারণ, উচ্চ পণ্যের ফলন, সহজ স্কেল-আপ এবং ডাউন স্ট্রিম অপারেটিং ইউনিটগুলিতে সুরক্ষা অপসারণের জন্য উচ্চ ক্ষমতার সংমিশ্রণ প্রয়োজন।

 

পদ্ধতি

সেন্ট্রিফিউগেশন: ডিফারেনশিয়াল সেন্ট্রিফিউগেশন বড় কণাগুলি সরিয়ে দেয়।

গভীর পরিস্রাবণ: সুপারেনট্যান্টকে স্পষ্ট করতে একটি মাল্টিস্টেজ ফিল্টার (যেমন 1.2μm → 0। 45μm) ব্যবহার করুন।

স্পর্শকাতর প্রবাহ পরিস্রাবণ (টিএফএফ): ব্যাপক উত্পাদনের জন্য উপযুক্ত, নমুনাগুলিকে কেন্দ্রীভূত করে এবং অমেধ্যের ছোট কণাগুলি সরিয়ে দেয়।

 

তবে, যদি চাষের স্কেল খুব বেশি হয় তবে কেন্দ্রীভূতকরণ দীর্ঘ সময় নেয়, প্রচুর পরিমাণে গভীর ফিল্টার ঝিল্লি প্রয়োজন হবে, সুতরাং গ্রাহকদের ব্যয় ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি পায়। একই সময়ে, কোষ সংস্কৃতির উচ্চ ঘনত্ব গভীর ফিল্টার ঝিল্লির বোঝা হ্রাস করবে, যার ফলে ব্যয় বৃদ্ধি এবং অতিরিক্ত পণ্য হ্রাস হবে।

 

দুটি ধরণের টিএফএফ ঝিল্লি উপাদান রয়েছে: ফ্ল্যাট ক্যাসেট এবং ফাঁকা ফাইবার। স্পর্শকাতর প্রবাহ পরিস্রাবণ (টিএফএফ) ট্রান্সমেম্ব্রেন চাপ পার্থক্য দ্বারা চালিত হয়। ঝিল্লি ছিদ্রের চেয়ে ছোট পদার্থ এবং অমেধ্যগুলি ঝিল্লির মধ্য দিয়ে যায়, যখন বৃহত্তর কণাযুক্ত কোষগুলির মতো অমেধ্যগুলি আটকা পড়ে থাকে। মাইক্রোফিল্ট্রেশনের জন্য ব্যবহৃত ঝিল্লির ছিদ্র আকার হ'ল 45/0.22μm। {{0}}। ফাঁকা ফাইবার উচ্চ ঘনত্বের কোষ সংস্কৃতি মাধ্যমের মতো সরাসরি উচ্চ শক্ত সামগ্রীর তরল প্রক্রিয়া করতে পারে, এটি সেন্ট্রিফিউগেশন এবং প্রাক-ফিল্টারেশন পদক্ষেপগুলি, কম পদক্ষেপ, সাধারণ অপারেশন, ঝিল্লি পরিষ্কার করার মাধ্যমে বারবার ব্যবহার করা যেতে পারে, সরঞ্জাম বিনিয়োগ এবং অপারেটিং ব্যয় হ্রাস করে, মডুলার অটোমেটেড উত্পাদনের প্রয়োজনীয়তার সাথে সামঞ্জস্য রেখে ব্যবহার করা যেতে পারে।

 

আল্ট্রাফিল্ট্রেশন ঘনত্ব (টিএফএফ):

লক্ষ্য: ক্রোমাটোগ্রাফিক চিকিত্সার পরিমাণ হ্রাস করতে, ক্রোমাটোগ্রাফিক দক্ষতা উন্নত করতে এবং ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামটি রক্ষা করুন।

সাধারণভাবে, আল্ট্রাফিল্ট্রেশন (টিএফএফ) ভিএলপির 100 বারেরও বেশি কেন্দ্রীভূত করতে পারে এবং হিটারোপ্রোটিন অপসারণের হার 99%এ পৌঁছতে পারে। এর মধ্যে, ফাঁকা ফাইবার ঝিল্লি পরিস্রাবণ প্রযুক্তির হালকা এবং কম শিয়ার ফোর্সের সুবিধা রয়েছে, প্লাগ করা সহজ নয়, নমনীয় অপারেশন, দীর্ঘ জীবন, স্বল্প ব্যয় এবং সহজ প্রশস্তকরণ, তাই ঘন এবং বিশুদ্ধ ভিএলপির জন্য ফাঁকা ফাইবার চয়ন করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

 

যখন আল্ট্রাফিল্ট্রেশন পদ্ধতিটি ঘনত্ব এবং পরিশোধন জন্য ব্যবহৃত হয়, তখন সঠিক ঝিল্লি ছিদ্র আকার নির্বাচন করা খুব গুরুত্বপূর্ণ, যা সরাসরি ঘনত্বের দক্ষতা এবং গুণমান নির্ধারণ করে। একদিকে, ফলন নিশ্চিত করার জন্য লক্ষ্য অণুগুলিকে কার্যকরভাবে ফাঁদে ফেলার জন্য ঝিল্লি অ্যাপারচারটি নির্বাচন করা প্রয়োজন এবং অন্যদিকে, হিটারোপ্রোটিনগুলির অপসারণ প্রভাব এবং প্রক্রিয়াকরণের গতি পুরোপুরি বিবেচনা করা উচিত। অতএব, সর্বোত্তম নীতিটি হ'ল বৃহত্তম ছিদ্র আকারের সাথে ঝিল্লিটি নির্বাচন করা যা লক্ষ্য অণু ফাঁদে ফেলতে পারে এবং অভিন্ন ছিদ্র আকারের বিতরণ সহ ফিল্টার ঝিল্লি নির্বাচন করার চেষ্টা করে।

 

প্রাথমিক পরিশোধন:

1। বৃষ্টিপাত পদ্ধতি

পলিথিলিন গ্লাইকোল (পিইজি) বৃষ্টিপাত: ভিএলপিগুলির নির্বাচনী বৃষ্টিপাতের ফলন এবং বিশুদ্ধতার ভারসাম্য বজায় রাখতে অনুকূলিত পিইজি ঘনত্ব এবং লবণের ঘনত্বের প্রয়োজন।

 

2। ক্রোমাটোগ্রাফি

অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি:

হেপারিন অ্যাফিনিটি: পৃষ্ঠের নেতিবাচক চার্জের ভিএলপিএস বৈশিষ্ট্য ব্যবহার করে (যেমন, এইচপিভি ভিএলপি)।

অ্যান্টিবডি কাপলিং ক্রোমাটোগ্রাফি: উচ্চ নির্দিষ্টতা তবে ব্যয়বহুল।

আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি (আইএক্স): ভিএলপি পৃষ্ঠের চার্জের বৈশিষ্ট্যগুলির উপর নির্ভর করে অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ (যেমন, কিউ কলাম) বা কেশন এক্সচেঞ্জ (যেমন, এসপি কলাম) চয়ন করুন এবং কণা সংহতকরণ এড়াতে পিএইচ এবং লবণের গ্রেডিয়েন্টকে অনুকূল করুন।

হাইড্রোফোবিক ইন্টারঅ্যাকশন ক্রোমাটোগ্রাফি (এইচআইসি): ভিএলপিএস পৃষ্ঠের হাইড্রোফোবিসিটি ভিত্তিক, কিছু অ-এনক্যাপসুলেটেড ভিএলপিগুলির জন্য উপযুক্ত।

 

সূক্ষ্ম পরিশোধন:

আণবিক বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফি (এসইসি, জেল পরিস্রাবণ):

বাফার প্রতিস্থাপনের সাথে অবশিষ্টাংশের হোস্ট প্রোটিন, নিউক্লিক অ্যাসিড বা সমষ্টিগুলি অপসারণ। উচ্চ রেজোলিউশন তবে কম ফ্লাক্স, প্রায়শই চূড়ান্ত পরিশোধন পদক্ষেপ হিসাবে ব্যবহৃত হয়।

 

মাল্টি-মোড ক্রোমাটোগ্রাফি:

উদাহরণস্বরূপ, ক্যাপ্টো কোর সিরিজের রেজিনগুলি, আয়ন এক্সচেঞ্জ এবং আণবিক চালনী প্রভাবের সাথে মিলিত, এক ধাপে বিভিন্ন ধরণের অমেধ্য অপসারণ করতে পারে।

 

ভাইরাস নিষ্ক্রিয়করণ/নিউক্লিক অ্যাসিড অপসারণ (প্রয়োজনে):

নিউক্লিজ চিকিত্সা: যেমন বেনজোনাস ডিগ্রেড হোস্ট ডিএনএ/আরএনএ।

ইউএফ/ডিএফ: নিউক্লিক অ্যাসিড এবং এনজাইমগুলির ছোট ছোট টুকরোগুলি অপসারণ করতে টিএফএফ সিস্টেমের সমন্বয় করা।

 

ঘনত্ব এবং প্রস্তুতি:

স্পর্শকাতর প্রবাহ পরিস্রাবণ (টিএফএফ):

বাফারগুলি স্থানচ্যুত করার সময় টাইটারগুলিকে লক্ষ্য করতে মনোনিবেশ করুন (যেমন পিবিএস বা ফর্মুলেশন বাফার)।

 

জীবাণুমুক্ত পরিস্রাবণ:

0। 22μm ঝিল্লি পরিস্রাবণ জীবাণু নিশ্চিত করে।

 

সাধারণ কেস

নিম্নলিখিতটি সাধারণ ভিএলপি ভ্যাকসিনগুলির জন্য ডাউন স্ট্রিম পরিশোধন প্রক্রিয়াগুলি রয়েছে।

 

 

গাইডলিং সম্পর্কে

গাইডলিং প্রযুক্তি হ'ল একটি উত্পাদন-ভিত্তিক এবং উচ্চ-প্রযুক্তি এন্টারপ্রাইজ যা বায়োফর্মাসিউটিক্যালসগুলির প্রবাহের স্পষ্টতা, বিচ্ছেদ এবং পরিশোধনকে কেন্দ্র করে। পণ্যগুলি এমএবি, ভ্যাকসিন, ডায়াগনোসিস, রক্ত ​​পণ্য, সিরাম, এন্ডোটক্সিন এবং অন্যান্য জৈবিক পণ্যগুলির পরিস্রাবণ প্রক্রিয়াতে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়; গাইডলিং প্রযুক্তির "ক্যাসেটস ফিল্টার এবং স্পর্শকাতর ফ্লো ফিল্টারেশন ডিভাইস", "হোলো ফাইবার ঝিল্লি", "ভাইরাস ফিল্টার", "ডিপ মেমব্রেন", "স্টেরিলাইজেশন ফিল্টার", "সেন্ট্রিফুগাল ফিল্টার ডিভাইস" এবং অন্যান্য পণ্য রয়েছে এবং প্রযোজনার জন্য ছোট ডিসপোজেবল ল্যাবরেটরি ফিল্ট্রেশন থেকে প্রচুর পরিমাণে পণ্য লাইন রয়েছে এবং প্রযোজনার মেটা, প্রযোজনার মেটা। গাইডলিং প্রযুক্তি আপনার সাথে সহযোগিতা করার অপেক্ষায় রয়েছে!