CM দুর্বল আয়ন-এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি
এসপি স্ট্রং ক্যাটেশন এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি পণ্যের ভূমিকা 1. সংক্ষিপ্ত বিবরণ এসপি শক্তিশালী ক্যাটেশন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি পরিশোধন কৌশল যেখানে সালফোনিক অ্যাসিড গ্রুপগুলি একটি ঝিল্লির সাথে একটি ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউল গঠনের জন্য বন্ধন করা হয়। পার্থক্যের ভিত্তিতে বিচ্ছেদ অর্জিত হয়...
পণ্য পরিচিতি
এসপি স্ট্রং ক্যাশন এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি পণ্য পরিচিতি
1. ওভারভিউ
এসপি শক্তিশালী ক্যাটেশন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি পরিশোধন কৌশল যেখানে সালফোনিক অ্যাসিড গ্রুপগুলি একটি ঝিল্লির সাথে একটি ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউল তৈরি করার জন্য বন্ধন করা হয়। বিভিন্ন জৈব অণুর চার্জের বৈশিষ্ট্য এবং চার্জের পরিমাণের পার্থক্যের উপর ভিত্তি করে পৃথকীকরণ করা হয়। যেহেতু বেশিরভাগ জৈবিক ম্যাক্রোমোলিকুলে কার্বক্সিল বা হাইড্রক্সিল গ্রুপ থাকে, তাই বাফার দ্রবণের pH মান সামঞ্জস্য করে তাদের চার্জ বৈশিষ্ট্য এবং পরিমাণ পরিবর্তন করা যেতে পারে। জৈব অণুগুলি বিপরীত চার্জ বহনকারী ঝিল্লি মডিউলগুলির সাথে আবদ্ধ হওয়ার পরে, মোবাইল ফেজের আয়নিক শক্তি বা pH প্রথমে দুর্বলভাবে আবদ্ধ উপাদানগুলিকে নির্মূল করার জন্য পরিবর্তন করা হয়, তারপরে দৃঢ়ভাবে আবদ্ধ উপাদানগুলি অনুসরণ করে, যার ফলে কার্যকর বিচ্ছেদ অর্জন করা হয়।
2. পণ্যের সুবিধা
দ্রুত এবং দক্ষ উচ্চ বাঁধাই ক্ষমতা প্রচলিত রজন ক্রোমাটোগ্রাফির চেয়ে 40 গুণ দ্রুত প্রবাহ হারে অর্জন করা যেতে পারে। প্রচলিত রেজিন ভিত্তিক ক্রোমাটোগ্রাফির সাথে তুলনা করে, মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে প্রক্রিয়ার সময় 30-40 গুণ কমানো যেতে পারে। সাধারণ অপারেটিং প্রবাহের হার প্রায় 10 MV/মিনিট।
2.2 হাই বাইন্ডিং এফিসিয়েন্সি মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি উচ্চ বাঁধাই ক্ষমতা এবং উচ্চ প্রবাহের হার নিম্নচাপের ড্রপ প্রদর্শন করে, মডিউলের মধ্য দিয়ে একটি একক পাসে চার্জযুক্ত জৈব অণুগুলিকে ক্যাপচার করতে সক্ষম করে।
2.3 পরিমাপযোগ্য এবং নমনীয় মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি পণ্যগুলির সম্পূর্ণ পরিসর জৈব অণু পরিশোধনের বিভিন্ন প্রয়োজন মেটাতে পারে, প্রক্রিয়া বিকাশ থেকে বৃহৎ আকারের উত্পাদন পর্যন্ত অ্যাপ্লিকেশনগুলিকে কভার করে৷ ক্যাপসুল ডিজাইন একক-ব্যবহারের অপারেশনের অনুমতি দেয় বা সঠিক পরিস্কার পদ্ধতির পরে পরিষ্কার এবং পুনরায় ব্যবহার করা যেতে পারে।
2.4 উন্নত উত্পাদনশীলতা কমপ্যাক্ট ডিজাইন সুবিধার পদচিহ্ন কমিয়ে দেয়। কলাম প্যাকিং, ক্লিনিং, ক্লিনিং ভ্যালিডেশন, এবং কলাম স্টোরেজের মতো ক্রিয়াকলাপগুলি বাদ দিয়ে, তুলনামূলকভাবে কম বাফারের সাথে সহজ সামঞ্জস্যের পরে প্রক্রিয়াকরণ শুরু হতে পারে। যেহেতু কলাম প্যাকিং, পরিষ্কার বা স্টোরেজের কোন প্রয়োজন নেই, তাই শ্রম খরচ 50% এর বেশি হ্রাস করা যেতে পারে।
3 প্রযুক্তিগত পরামিতি
3.1 কাঠামোগত উপকরণ
|
ল্যাব স্কেল |
ছোট স্কেল |
পাইলট স্কেল |
উৎপাদন স্কেল |
|
|
ঝিল্লি ভলিউম |
0.2 মিলি |
5 মিলি |
140 মিলি |
5L |
|
মেমব্রেন সাপোর্ট স্ট্রাকচার |
পলিপ্রোপিলিন |
|||
|
ঝিল্লি হাউজিং |
পলিপ্রোপিলিন |
|||
|
হে রিং |
সিলিকন |
|||
3.2 অপারেটিং বৈশিষ্ট্য
|
ল্যাব স্কেল |
ছোট স্কেল |
পাইলট স্কেল |
উৎপাদন স্কেল |
|
|
ঝিল্লি ভলিউম |
0.2 মিলি |
5 মিলি |
400 মিলি |
5L |
|
প্রস্তাবিত প্রবাহ হার |
1-6 মিলি/মিনিট |
25-150 মিলি/মিনিট |
2-12L/মিনিট |
25-150L/মিনিট |
|
সর্বোচ্চ অপারেটিং তাপমাত্রা |
35 ডিগ্রী |
|||
|
সর্বাধিক অপারেটিং চাপ |
3বার (25 ডিগ্রী) |
|||
|
সর্বোচ্চ চাপ পার্থক্য |
3বার (25 ডিগ্রী) |
|||
|
স্টোরেজ শর্ত |
20% eথানলaবিশ্রীsঅলিউশন |
|||
তুলনা দেখায় যে SP মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফির পরিষেবা জীবন SP Sepharose 6FF এর সাথে তুলনীয়।
চিত্র 1. লাইসোজাইম দিয়ে পরীক্ষিত একাধিক ব্যবহারের পর এসপি মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফির বাঁধাই ক্ষমতার পরিবর্তন
উপরন্তু, আমরা হোস্ট সেল প্রোটিন এবং নিউক্লিক অ্যাসিড অপসারণের দক্ষতার জন্য ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি মূল্যায়ন করেছি। ফলাফল নিম্নরূপ:
|
|
ডিএনএ |
এইচসিপি |
|||||
|
|
আইজিজি রিকভারি |
RT PCR দ্বারা বিষয়বস্তু (IgG-এর pg/mg) |
অপসারণ ফ্যাক্টর |
এলিসা দ্বারা সামগ্রী (IgG এর ng/mg) |
অপসারণ ফ্যাক্টর |
||
|
চালান |
% |
কিউ মেমব্রেনের আগে |
কিউ মেমব্রেনের পরে |
লগ |
কিউ মেমব্রেনের আগে |
কিউ মেমব্রেনের পরে |
লগ |
|
1 |
96.4 |
423 |
3.6 |
2.07 |
7 |
4.3 |
0.21 |
|
2 |
97.4 |
438 |
4.3 |
2.01 |
7 |
4.7 |
0.17 |
|
3 |
94.1 |
513 |
5.8 |
1.95 |
6 |
2.3 |
0.42 |
|
4 |
96.2 |
32 |
0.8 |
1.60 |
6 |
3.2 |
0.27 |
|
5 |
96.3 |
45 |
1.9 |
1.37 |
8 |
3.4 |
0.37 |
|
6 |
96.7 |
158 |
2.4 |
1.82 |
8 |
3.5 |
0.36 |
|
7 |
96.4 |
267 |
2.6 |
2.01 |
9 |
6 |
0.18 |
|
8 |
96.8 |
298 |
3.6 |
1.92 |
9 |
7 |
0.11 |
|
9 |
97.9 |
746 |
9.8 |
1.88 |
4 |
1.5 |
0.43 |
|
10 |
96.2 |
39 |
3.2 |
1.09 |
4 |
1.4 |
0.46 |
সারণি 1. সিএইচওতে ডিএনএ এবং হোস্ট সেল প্রোটিন অপসারণের হার-এসপি মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে প্রকাশ করা আইজিজি উপাদান
পরীক্ষার একটি সিরিজ প্রমাণ করেছে যে এসপি ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি লক্ষ্য IgG এর একটি উচ্চ পুনরুদ্ধারের হার বজায় রেখে দূষকগুলিকে কার্যকরভাবে অপসারণ করতে পারে।
আমদানি করা ব্র্যান্ডের সাথে গুডিলিং এসপি মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি তুলনা করার সময়, বাঁধাই ক্ষমতার ডেটা নিম্নরূপ:
|
বাঁধাইcঅক্ষমতা (mg/mL) |
সার্টোরিয়াস |
PALL |
গাইডলিং |
|
লাইসোজাইম |
25 |
32 |
29 |
|
ট্রিপসিন |
22 |
27 |
25 |
সারণি 2. আমাদের পণ্য এবং প্রতিযোগী ব্র্যান্ডের বিভিন্ন প্রোটিনের বাইন্ডিং ক্যাপাসিটি পারফরম্যান্স
সামগ্রিক মূল্যায়ন দেখায় যে আমাদের বাঁধাই ক্ষমতা আমদানিকৃত পণ্যের সাথে তুলনীয়।
চিত্র 2. স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে লাইসোজাইম ব্যবহার করে এসপি মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউলের বাঁধাই ক্ষমতা পরীক্ষা
ডায়নামিক বাইন্ডিং ক্ষমতা এবং আমদানিকৃত পণ্যের সাথে তুলনা করে, এটি নিশ্চিত করা হয়েছিল যে 190 মিমি NaCl এ লাইসোজাইম বিলুপ্ত হলে বেশিরভাগ লক্ষ্য প্রোটিন ক্যাপচার করা যেতে পারে।
বিভিন্ন ইলুশন অবস্থার মাধ্যমে, আমরা দেখতে পেলাম যে মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফির ইলুশন প্রোফাইলগুলি অ্যাগারোজ জেলের মতো, তবে প্রোটিনের বিশুদ্ধতা বিভিন্ন লবণের ঘনত্বে উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়। প্রকৃত গবেষণা ও উন্নয়ন এবং উৎপাদনে, উচ্চ-বিশুদ্ধতা লক্ষ্য প্রোটিন পাওয়ার জন্য সর্বোত্তম নির্গমনের শর্তগুলি পরিমাণগতভাবে নির্ধারণ করা প্রয়োজন।
4 টিপিক্যাল অ্যাপ্লিকেশন কেস
ডিএনএ, ভাইরাস এবং হোস্ট সেল প্রোটিন অপসারণ
প্লাজমিড, ভাইরাস, প্রোটিন ক্যাপচার এবং অলিগোনিউক্লিওটাইডের পরিশোধন
খামির গাঁজন ঝোল থেকে রঙ্গক অপসারণ এবং উচ্চ-ক্ষমতা প্রোটিন ক্যাপচার
5 ব্যবহার পদ্ধতি
5.1 সরঞ্জাম প্রস্তুতি এবং সমাবেশ:
5.1.1: একটি ÄKTA ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেমে মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউলটি ইনস্টল করুন রজন কলামের অনুরূপ পদ্ধতি অনুসরণ করে, মডিউলের তীর এবং খাঁড়ি অভিযোজনের সাথে প্রবাহের দিকটি নিশ্চিত করে। সিস্টেমে সুরক্ষিত ইন্টিগ্রেশনের জন্য লুয়ার লক বা ক্ল্যাম্প-স্টাইল ফিটিং ব্যবহার করে মডিউলটি সংযুক্ত করুন।
5.1.2 ফিড প্রবাহ হার সেট করুন5-10 MV/মিনিটএবং ভারসাম্য বাফার ব্যবহার করে মডিউলটি ডিগাস করে, নিশ্চিত করে যে বর্জ্য বায়ু বুদবুদ মুক্ত। ডিগ্যাস হয়ে গেলে, পারমিট আউটলেটটিকে ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেমের সাথে সংযুক্ত করুন।
5.2:প্রি-চিকিৎসা ব্যবহার করুন:
5.2.1:
ফিড প্রবাহ হার সেট করুন5-10 MV/মিনিটএবং এর সাথে প্রাক-চিকিৎসা করুন0.5 M NaOH 5 MV-এর বেশি, ঝিল্লি সম্পূর্ণ ভারসাম্য পৌঁছে নিশ্চিত করা.
5.2.2: একই প্রবাহ হারে, এর সাথে প্রাক-চিকিৎসা করুন৷1 M NaCl 5 MV-এর বেশিঝিল্লি সম্পূর্ণ ভারসাম্য পৌঁছে নিশ্চিত করতে.
5.3 ক্রোমাটোগ্রাফি প্রক্রিয়া
5.3.1 ফিড প্রবাহের হার 5-10 MV/মিনিট সেট করুন এবং 5 MV-এর বেশি ভারসাম্য বাফার দিয়ে ঝিল্লিকে ভারসাম্য করুন, যতক্ষণ না ঝিল্লি সম্পূর্ণ ভারসাম্যে পৌঁছায়।
5.3.2 0.22 μm প্রি-পরিস্রাবণের পরে, নমুনাটি ঝিল্লিতে লোড করুন যতক্ষণ না নমুনা লোডিং সম্পূর্ণ হয় বা ক্রোমাটোগ্রাফিক বাইন্ডিং ক্ষমতা না পৌঁছায়৷
5.3.3 UV সিগন্যাল বেসলাইনে ফিরে না আসা পর্যন্ত 10 MV-এর বেশি ভারসাম্য বাফার দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।
5.3.4 প্রক্রিয়া নকশা অনুযায়ী গ্রেডিয়েন্ট ইলিউশন বা স্টেপওয়াইজ ইলিউশন প্রয়োগ করুন এবং প্রয়োজন অনুযায়ী ভগ্নাংশ সংগ্রহ করুন।
5.4 CIP পোস্ট-চিকিৎসা ব্যবহার করুন – মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ডিভাইস সিআইপি (স্থানে পরিষ্কার করা)
5.4.1 ফিড ফ্লো রেট 5-10 MV/মিনিট সেট করুন এবং 1 M NaOH দিয়ে 10 MV-এর বেশি ক্লিনিং করুন, যতক্ষণ না UV সিগন্যাল বেসলাইনের নিচে নেমে আসে।
5.4.2 30 মিনিটের জন্য সঞ্চালনের পরে, pH 7-8 না পৌঁছানো পর্যন্ত জল ধোয়াতে স্যুইচ করুন, তারপর পরিবাহিতা প্রায় স্থির না হওয়া পর্যন্ত 20% ইথানল দিয়ে পরিষ্কার করা চালিয়ে যান।
5.5 মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি স্টোরেজ
সিআইপি ব্যবহার এবং সমাপ্তির পরে, ঝিল্লি মডিউলটি 20% ইথানলে ভিজিয়ে অপসারণ এবং সংরক্ষণ করা যেতে পারে, অথবা এটি 20% ইথানলযুক্ত দ্রবণে ঘরের তাপমাত্রায়- লাইনে সংরক্ষণ করা যেতে পারে। 20% ইথানল দ্রবণ পর্যায়ক্রমে পরিদর্শন এবং প্রতিস্থাপন করা উচিত।
6. তথ্য অর্ডার
Q স্ট্রং অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ক্যাপসুল ফিল্টার
|
ল্যাব স্কেল |
ছোট স্কেল |
পাইলট স্কেল |
উৎপাদন স্কেল |
|
|
পণ্যের মডেল |
IEXQ0002ES |
IEXQ0050ES |
IEXQ0400ES |
IEXQ5000ES |
|
ঝিল্লি ভলিউম |
0.2 মিলি |
5 মিলি |
400 মিলি |
5L |
গরম ট্যাগ: সেমি দুর্বল আয়ন-এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি, চীন, সরবরাহকারী, নির্মাতা, কারখানা, পাইকারি, বাল্ক, স্টকে, বিনামূল্যের নমুনা
তুমি এটাও পছন্দ করতে পারো
অনুসন্ধান পাঠান
