Q স্ট্রং অ্যানিয়ন মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি
1.ওভারভিউ আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি পরিশোধন কৌশল যা জৈব অণুগুলিকে তাদের চার্জের বৈশিষ্ট্য এবং চার্জের পরিমাণের পার্থক্যের ভিত্তিতে আলাদা করে। যেহেতু বেশিরভাগ জৈবিক ম্যাক্রোমোলিকুলে কার্বক্সিল বা হাইড্রক্সিল গ্রুপ থাকে, তাই তাদের চার্জের বৈশিষ্ট্য এবং মাত্রা সামঞ্জস্য করা যেতে পারে...
পণ্য পরিচিতি
1. ওভারভিউ
আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি পরিশোধন কৌশল যা জৈব অণুগুলিকে তাদের চার্জের বৈশিষ্ট্য এবং চার্জের পরিমাণের পার্থক্যের ভিত্তিতে আলাদা করে। যেহেতু বেশিরভাগ জৈবিক ম্যাক্রোমোলিকুলে কার্বক্সিল বা হাইড্রক্সিল গ্রুপ থাকে, তাই তাদের চার্জের বৈশিষ্ট্য এবং মাত্রা বাফার দ্রবণের pH মান নিয়ন্ত্রণ করে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে। জৈব অণুগুলি বিপরীতভাবে আধানযুক্ত অ্যানান বা ক্যাটেশন বিনিময় মাধ্যমের সাথে আবদ্ধ হওয়ার পরে, মোবাইল ফেজের আয়নিক শক্তি বা pH পরিবর্তন করে বিচ্ছেদ অর্জন করা হয়, যার ফলে দুর্বলভাবে আবদ্ধ অণুগুলি প্রথমে নির্গত হয়, তারপরে দৃঢ়ভাবে আবদ্ধ অণুগুলি।
2. পণ্যের সুবিধা
2.1 দ্রুত এবং দক্ষ - প্রচলিত রেজিনের চেয়ে 40 গুণ দ্রুত প্রবাহ হারে উচ্চ বাঁধাই ক্ষমতা অর্জন করে। প্যাকড-বেড ক্রোমাটোগ্রাফির সাথে তুলনা করে, মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে প্রক্রিয়ার সময় 30-40 গুণ কমে যায়। সাধারণ অপারেটিং প্রবাহ হার 10 MV/মিনিট।
2.2 উচ্চ বাইন্ডিং দক্ষতা - ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি উচ্চ লোডিং ক্ষমতা এবং উচ্চ প্রবাহের হার নিম্নচাপের ড্রপ অবস্থায় প্রদর্শন করে, চার্জযুক্ত জৈব অণুগুলিকে একটি একক পাসে ক্যাপচার করার অনুমতি দেয়।
2.3 স্কেলেবল এবং নমনীয় - মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি পণ্যগুলির সম্পূর্ণ সিরিজ বায়োম্যাক্রোমোলিকুল পরিশোধনের বিভিন্ন চাহিদা মেটাতে পারে, প্রক্রিয়া বিকাশ থেকে বৃহৎ আকারে উৎপাদন পর্যন্ত সমস্ত স্তরকে কভার করে৷ ক্যাপসুল-টাইপ স্ট্রাকচারাল ডিজাইন একক-ব্যবহারের অপারেশন এবং পরিষ্কারের পরে পুনরায় ব্যবহার উভয়কেই সমর্থন করে।
2.4 উৎপাদনশীলতা উন্নত করুন - কমপ্যাক্ট ডিজাইন সুবিধার পদচিহ্নকে ছোট করে। কলাম প্যাকিং, ক্লিনিং, ক্লিনিং ভ্যালিডেশন, এবং কলাম স্টোরেজ অপারেশন বাদ দিয়ে, প্রক্রিয়াটির ভারসাম্যের জন্য কম বাফার প্রয়োজন এবং কলাম প্রস্তুতি ছাড়াই সরাসরি সম্পাদিত হতে পারে। শ্রম খরচ 50% পর্যন্ত কমানো যেতে পারে।
3. প্রযুক্তিগত পরামিতি
3.1 কাঠামোগত উপাদান
|
ল্যাব স্কেল |
ছোট স্কেল |
পাইলট স্কেল |
উৎপাদন স্কেল |
|
|
ঝিল্লি ভলিউম |
0.2 মিলি |
5 মিলি |
140 মিলি |
5L |
|
ঝিল্লি সমর্থন গঠন: |
পলিপ্রোপিলিন (পিপি) |
|||
|
ঝিল্লি হাউজিং |
পলিপ্রোপিলিন (পিপি) |
|||
|
হে রিং |
সিলিকন |
|||
3.2 অপারেটিং বৈশিষ্ট্য
|
ল্যাব স্কেল |
ছোট স্কেল |
পাইলট স্কেল |
উৎপাদন স্কেল |
|
|
ঝিল্লি ভলিউম |
0.2 মিলি |
5 মিলি |
400 মিলি |
5L |
|
প্রস্তাবিত প্রবাহ হার |
1-6 মিলি/মিনিট |
25-150 মিলি/মিনিট |
2-12L/মিনিট |
25-150L/মিনিট |
|
সর্বোচ্চ অপারেটিং তাপমাত্রা |
35 ডিগ্রী |
|||
|
সর্বাধিক অপারেটিং চাপ |
3বার (25 ডিগ্রী) |
|||
|
সর্বোচ্চ চাপের পার্থক্য |
3বার (25 ডিগ্রী) |
|||
|
স্টোরেজ শর্ত: |
20% ইথানল জলীয় দ্রবণ |
|||
কিউ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফির সার্ভিস লাইফ অ্যাগারোজ জেল ক্রোমাটোগ্রাফির সাথে তুলনীয়।
চিত্র 1. বিএসএ দ্বারা পর্যবেক্ষণ করা একাধিক ব্যবহারের পরে ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি লোডিং ক্ষমতার পরিবর্তন
অতিরিক্তভাবে, আমরা হোস্ট সেল প্রোটিন এবং নিউক্লিক অ্যাসিডগুলির জন্য ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফির অপসারণের দক্ষতা মূল্যায়ন করেছি। ফলাফল নিম্নরূপ.
|
|
ডিএনএ |
এইচসিপি |
|||||
|
|
আইজিজি রিকভারি |
RT PCR দ্বারা সামগ্রী (IgG এর pg/mg) |
অপসারণ ফ্যাক্টর |
এলিসা দ্বারা সামগ্রী (IgG এর ng/mg) |
অপসারণ ফ্যাক্টর |
||
|
চালান |
% |
কিউ মেমব্রেনের আগে |
কিউ মেমব্রেনের পরে |
লগ |
কিউ মেমব্রেনের আগে |
কিউ মেমব্রেনের পরে |
লগ |
|
1 |
96.7 |
423 |
1.2 |
2.55 |
7 |
4.8 |
0.16 |
|
2 |
97.4 |
438 |
1.3 |
2.53 |
7 |
4.9 |
0.15 |
|
3 |
94.7 |
513 |
1.3 |
2.60 |
6 |
1.9 |
0.50 |
|
4 |
95 |
32 |
0.9 |
1.55 |
6 |
4.2 |
0.15 |
|
5 |
96.3 |
45 |
1.1 |
1.61 |
8 |
5.2 |
0.19 |
|
6 |
96.5 |
158 |
0.7 |
2.35 |
8 |
6.2 |
0.11 |
|
7 |
96.4 |
267 |
1.9 |
2.15 |
9 |
7.2 |
0.10 |
|
8 |
96.8 |
298 |
2.3 |
2.11 |
9 |
8.2 |
0.04 |
|
9 |
97.1 |
746 |
1.5 |
2.70 |
4 |
2 |
0.30 |
|
10 |
96.6 |
39 |
1 |
1.59 |
4 |
1.5 |
0.43 |
সারণী 1. Q মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে CHO- প্রকাশকৃত IgG উপাদানে DNA এবং হোস্ট সেল প্রোটিন অপসারণের হার
পরীক্ষা-নিরীক্ষার একটি সিরিজ প্রমাণ করেছে যে Q মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি উচ্চ লক্ষ্য IgG পুনরুদ্ধার বজায় রেখে কার্যকরভাবে অমেধ্য অপসারণ করতে পারে।
উপরন্তু, আমরা আমদানি করা ব্র্যান্ডের সাথে গুডিলিং মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি তুলনা করেছি এবং লোডিং ক্ষমতার ডেটা নিম্নরূপ:
|
লোডিং ক্ষমতা (mg/ml) |
সার্টোরিয়াস |
PALL |
গাইডলিং |
|
বিএসএ |
29 |
60 |
45 |
|
এসওডি |
25 |
40 |
35 |
|
প্রোটিন এ |
27 |
45 |
40 |
|
ট্রিপসিন |
30 |
56 |
44 |
সারণি 2. আমাদের পণ্য এবং প্রতিযোগী পণ্যগুলিতে বিভিন্ন প্রোটিনের কার্যক্ষমতা লোড হচ্ছে
সামগ্রিক মূল্যায়ন দেখায় যে আমাদের লোডিং ক্ষমতা আমদানিকৃত পণ্যের সাথে তুলনীয়,
চিত্র 2।একটি Q মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউল ব্যবহার করে, BSA বাঁধাই ক্ষমতা মূল্যায়ন করার জন্য স্ট্যান্ডার্ড প্রোটিন হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। ডায়নামিক বাইন্ডিং ক্ষমতা আমদানিকৃত পণ্যের সাথে তুলনা করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে বেশিরভাগ লক্ষ্য প্রোটিন ক্যাপচার করা যায় এবং এর সাথে ইলুট করা যায়150 মিমি NaClমডেল প্রোটিন হিসাবে BSA ব্যবহার করার সময়।
বিভিন্ন ইলুশন অবস্থার মাধ্যমে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফির ইলুশন আচরণ অ্যাগারোজ জেল ক্রোমাটোগ্রাফির মতো। বিভিন্ন লবণের ঘনত্বে নির্গত প্রোটিনের বিশুদ্ধতা উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়। প্রকৃত প্রক্রিয়ার বিকাশ এবং উৎপাদনে, উচ্চ বিশুদ্ধতার সাথে লক্ষ্য প্রোটিন পাওয়ার জন্য সর্বোত্তম বিলুপ্তির শর্তগুলি পরিমাণগতভাবে নির্ধারণ করা প্রয়োজন।
4. সাধারণ অ্যাপ্লিকেশন কেস
ডিএনএ, ভাইরাস, হোস্ট সেল প্রোটিন (HCP), এবং এন্ডোটক্সিন অপসারণ
প্লাজমিড, ভাইরাস এবং প্রোটিন ক্যাপচার, সেইসাথে অলিগোনিউক্লিওটাইডের পরিশোধন
5. অপারেটিং পদ্ধতি
5.1: সরঞ্জাম প্রস্তুতি এবং সমাবেশ:
5.1.1: AKTA ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেম: ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউলটি বস্তাবন্দী কলামের অনুরূপভাবে ইনস্টল করুন। নিশ্চিত করুন যে মডিউলের তীরের দিকটি ফিড প্রবাহের দিকের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। লুয়ার সংযোগকারী বা ট্রাই-ক্ল্যাম্প ফিটিং ব্যবহার করে সিস্টেমটি সংযুক্ত করুন।
5.1.2 ইনলেট প্রবাহের হার 5-10 MV/মিনিট সেট করুন এবং সিস্টেম থেকে বায়ু অপসারণের জন্য ভারসাম্য বাফার ব্যবহার করুন৷ আউটলেট স্ট্রীমে কোন বায়ু বুদবুদ নেই তা নিশ্চিত করার পরে, পারমিট আউটলেটটিকে ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেমের সাথে সংযুক্ত করুন।
5.2:প্রি-ব্যবহারের চিকিৎসা:
5.2.1:
Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >ঝিল্লি ভারসাম্য পৌঁছে নিশ্চিত করতে 5 MV।
5.2.2:
At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >ঝিল্লি ভারসাম্য পৌঁছে নিশ্চিত করতে 5 MV।
5.3 ক্রোমাটোগ্রাফি প্রক্রিয়া
5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV যতক্ষণ না ঝিল্লি ভারসাম্যে পৌঁছায়।
5.3.2 নমুনাটি একটি 0.22 μm ফিল্টারের মাধ্যমে আগে থেকে- ফিল্টার করার পরে, সম্পূর্ণ নমুনা প্রয়োগ না হওয়া পর্যন্ত বা ক্রোমাটোগ্রাফি বাইন্ডিং ক্ষমতা না পৌঁছানো পর্যন্ত এটিকে কলামে লোড করুন৷
5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV যতক্ষণ না UV সংকেত বেসলাইনে নেমে আসে।
5.3.4 পরিকল্পিত প্রোটোকল অনুযায়ী গ্রেডিয়েন্ট বা রৈখিক ইলিউশন সম্পাদন করুন এবং প্রয়োজন অনুযায়ী ভগ্নাংশ সংগ্রহ করুন।
5.4 CIP পোস্ট-চিকিৎসা ব্যবহার করুন – মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ডিভাইস CIP
5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV যতক্ষণ না UV সংকেত বেসলাইনের নিচে নেমে যায়।
5.4.2 30 মিনিটের জন্য সঞ্চালনের পরে, pH 7-8 না পৌঁছানো পর্যন্ত ওয়াটার ওয়াশ-এ স্যুইচ করুন, তারপর 20% ইথানলে স্যুইচ করুন এবং পরিবাহিতা স্থিতিশীল না হওয়া পর্যন্ত ধোয়া চালিয়ে যান।
5.5, মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি স্টোরেজ:
সিআইপি ব্যবহার এবং সমাপ্তির পরে, ঝিল্লি মডিউলটি 20% ইথানলে বিচ্ছিন্ন এবং সংরক্ষণ করা যেতে পারে, বা 20% ইথানলে ঘরের তাপমাত্রায় অনলাইনে রাখা যেতে পারে। ইথানল দ্রবণটি পর্যায়ক্রমে প্রতিস্থাপন এবং পরিদর্শন করা উচিত।
6. অর্ডার তথ্য
Q স্ট্রং অ্যানিয়ন-এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ক্যাপসুল ফিল্টার
|
ল্যাব স্কেল |
ছোট স্কেল |
পাইলট স্কেল |
উৎপাদন স্কেল |
|
|
পণ্যের মডেল |
IEXQ0002ES |
IEXQ0050ES |
IEXQ0400ES |
IEXQ5000ES |
|
ঝিল্লি ভলিউম |
0.2 মিলি |
5 মিলি |
400 মিলি |
5L |
গরম ট্যাগ: q শক্তিশালী anion ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি, চীন, সরবরাহকারী, নির্মাতারা, কারখানা, পাইকারি, বাল্ক, স্টক, বিনামূল্যে নমুনা
তুমি এটাও পছন্দ করতে পারো
অনুসন্ধান পাঠান
