DEAE দুর্বল অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি

DEAE দুর্বল অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি - পণ্য পরিচিতি

 

1. ওভারভিউ

DEAE দুর্বল অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি হল চার্জ বৈশিষ্ট্য এবং বিভিন্ন জৈব অণুর চার্জ ঘনত্বের পার্থক্যের উপর ভিত্তি করে একটি পরিশোধন কৌশল। যেহেতু বেশিরভাগ বায়োম্যাক্রোমলিকুলে কার্বক্সিল বা হাইড্রক্সিল গ্রুপের মতো কার্যকরী গ্রুপ থাকে, তাই তাদের চার্জের বৈশিষ্ট্য এবং মাত্রা বাফার দ্রবণের pH পরিবর্তন করে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে। জৈব অণুগুলি বিপরীতভাবে চার্জযুক্ত অ্যানান বা ক্যাটেশন বিনিময় মাধ্যমের সাথে আবদ্ধ হওয়ার পরে, মোবাইল ফেজের আয়নিক শক্তি বা pH পরিবর্তন করে বিচ্ছেদ অর্জন করা হয়। দুর্বল বাইন্ডিং অ্যাফিনিটি সহ অণুগুলিকে প্রথমে বিলুপ্ত করা হয়, তারপরে শক্তিশালী বাঁধাই সম্বন্ধযুক্ত অণুগুলিকে অনুসরণ করা হয়, যার ফলে কার্যকর বিচ্ছেদ সম্পন্ন হয়

 

2. পণ্যের সুবিধা

2.1 উচ্চ দক্ষতা: রজন-ভিত্তিক ক্রোমাটোগ্রাফির চেয়ে 40 গুণ বেশি প্রবাহ হারে শক্তিশালী বাঁধাই অর্জন করে। প্রথাগত প্যাকড-বেড ক্রোমাটোগ্রাফির সাথে তুলনা করে, মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি সামগ্রিক প্রক্রিয়ার সময়কে প্রায় 30-40 গুণ কমিয়ে দেয়।

2.2 উচ্চ বাইন্ডিং দক্ষতা: ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি উচ্চ বাঁধাই ক্ষমতা এবং উচ্চ প্রবাহ হার কম চাপের ড্রপের অধীনে প্রদর্শন করে, যা কলামের মধ্য দিয়ে একটি একক পাসে চার্জযুক্ত জৈব অণুগুলিকে ক্যাপচার করার অনুমতি দেয়।

2.3 পরিমাপযোগ্য এবং নমনীয়: মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি পণ্যগুলির সম্পূর্ণ সিরিজ বিভিন্ন বায়োম্যাক্রোমোলিকুল পরিশোধন চাহিদা মেটাতে পারে, প্রক্রিয়া বিকাশ থেকে বৃহৎ আকারের উৎপাদন পর্যন্ত সমস্ত ধাপকে কভার করে। ক্যাপসুল-টাইপ স্ট্রাকচারাল ডিজাইন একক-ব্যবহারের অপারেশন এবং পরিষ্কারের পরে পুনরায় ব্যবহার উভয়কেই সমর্থন করে।

2.4 উন্নত উত্পাদনশীলতা: কমপ্যাক্ট ডিজাইন সুবিধার পদচিহ্নকে ছোট করে। কলাম প্যাকিং, ক্লিনিং, ক্লিনিং ভ্যালিডেশন, এবং কলাম স্টোরেজ পদ্ধতিগুলি বাদ দিয়ে, কলাম প্যাকিং বা স্টোরেজ ছাড়াই বাফার ভারসাম্যের পরে সিস্টেমটি সরাসরি পরিচালনা করা যেতে পারে। শ্রম খরচ 50% পর্যন্ত কমানো যেতে পারে।

 

3. প্রযুক্তিগত পরামিতি

3.1 কাঠামোগত উপকরণ

	পরীক্ষাগার স্কেল	ছোট স্কেল	পাইলট স্কেল	উৎপাদন স্কেল
ঝিল্লি ভলিউম	0.2 মিলি	5 মিলি	140 মিলি	5L
ঝিল্লি সমর্থন কাঠামো	পলিপ্রোপিলিন (পিপি)
ঝিল্লি হাউজিং	পলিপ্রোপিলিন (পিপি)
হে রিং	সিলিকন

3.2 অপারেটিং বৈশিষ্ট্য

	পরীক্ষাগার স্কেল	ছোট স্কেল	পাইলট স্কেল	উৎপাদন স্কেল
ঝিল্লি ভলিউম	0.2 মিলি	5 মিলি	400 মিলি	5L
প্রস্তাবিত প্রবাহ হার	1-6 মিলি/মিনিট	25-150 মিলি/মিনিট	2-12L/মিনিট	25-150L/মিনিট
সর্বোচ্চ অপারেটিং তাপমাত্রা	35 ডিগ্রী
সর্বাধিক অপারেটিং চাপ	3বার (25 ডিগ্রী)
সর্বোচ্চ ডিফারেনশিয়াল চাপ	3বার (25 ডিগ্রী)
স্টোরেজ শর্ত	20% 乙醇水溶液 20% ইথানল জলীয় দ্রবণ

চিত্র 1. বিএসএ-এর সাথে একাধিক ব্যবহারের পর ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি লোডিং ক্ষমতার পরিবর্তন।

উপরন্তু, আমরা DEAE ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে হোস্ট সেল প্রোটিন এবং নিউক্লিক অ্যাসিড অপসারণের দক্ষতা মূল্যায়ন করেছি। ফলাফল নিম্নরূপ.

	ডিএনএ				এইচসিপি
	আইজিজি রিকভারি	RT PCR দ্বারা বিষয়বস্তু (IgG-এর pg/mg)		অপসারণ ফ্যাক্টর	এলিসা দ্বারা সামগ্রী (IgG এর ng/mg)		অপসারণ ফ্যাক্টর
চালান	%	DEAE মেমব্রেনের আগে	DEAE মেমব্রেনের পরে	লগ	DEAE মেমব্রেনের আগে	DEAE মেমব্রেনের পরে	লগ
1	96.7	423	3.5	2.08	7.8	5	0.19
2	97.4	438	6	1.86	7.7	4.9	0.20
3	94.7	513	8	1.81	6.3	1.9	0.52
4	95	32	2	1.20	6	4.2	0.15
5	96.3	45	6	0.88	8.1	5.2	0.19
6	96.5	158	3	1.72	8.7	6.2	0.15
7	96.4	267	2	2.13	9.8	7.1	0.14
8	96.8	298	7	1.63	9.4	8.2	0.06
9	97.1	746	5	2.17	4.3	2.6	0.22
10	96.6	39	2	1.29	4.4	1.7	0.41

সারণী 1. CHO- থেকে DNA এবং হোস্ট সেল প্রোটিন অপসারণের হার DEAE মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে IgG প্রকাশ করে৷

পরীক্ষার একটি সিরিজ প্রমাণ করেছে যে Q মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি কার্যকরভাবে অমেধ্য অপসারণ করতে পারে, লক্ষ্য IgG-এর উচ্চ পুনরুদ্ধারের হার বজায় রেখে।

উপরন্তু, আমরা আমদানি করা ব্র্যান্ডের সাথে গুডিলিং মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি তুলনা করেছি এবং লোডিং ক্ষমতার ডেটা নিম্নরূপ।

চিত্র 2. আমাদের ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি এবং প্রতিযোগী পণ্যগুলিতে বিভিন্ন প্রোটিনের কর্মক্ষমতা লোড হচ্ছে

সামগ্রিক মূল্যায়ন দেখায় যে আমাদের লোডিং ক্ষমতা আমদানিকৃত পণ্যের সাথে তুলনীয়।

চিত্র 3. কোলাজেন প্রোটিন পরীক্ষায় DEAE ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউলের কর্মক্ষমতা

DEAE মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউল ব্যবহার করে, যাচাইকরণের ফলাফল দেখায় যে বেশিরভাগ টার্গেট কোলাজেন প্রোটিন 135 মিমি NaCl ব্যবহার করে ক্যাপচার করা এবং ইলুট করা যেতে পারে।

বিভিন্ন ইলুশন অবস্থার অধীনে পরীক্ষার মাধ্যমে, আমরা দেখতে পেলাম যে মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি এবং অ্যাগারোজ জেল ক্রোমাটোগ্রাফি একই রকম ইলুশন আচরণ প্রদর্শন করে, যেখানে প্রোটিন বিশুদ্ধতা বিভিন্ন লবণের ঘনত্বের অধীনে উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়। ব্যবহারিক R&D এবং উৎপাদনে, উচ্চ-বিশুদ্ধতা লক্ষ্য প্রোটিন পেতে সর্বোত্তম ভারসাম্য নির্গত অবস্থার পরিমাণগতভাবে নির্ধারণ করা প্রয়োজন।

 

4. ক্লাসিক আবেদন ক্ষেত্রে

ডিএনএ, ভাইরাস, হোস্ট সেল প্রোটিন এবং এন্ডোটক্সিন অপসারণ

প্লাজমিড, ভাইরাস, নিউক্লিক অ্যাসিড এবং প্রোটিন ক্যাপচার, সেইসাথে অলিগোনিউক্লিওটাইডের পরিশোধন

 

5. অপারেটিং কর্মপ্রবাহ

5.1: সরঞ্জাম প্রস্তুতি এবং সমাবেশ

5.1.1 মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি মডিউলটি AKTA ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেমে প্যাক করা রজন কলামের অনুরূপভাবে ইনস্টল করা উচিত, যাতে প্রবাহের দিকটি তীর এবং খাঁড়ি দিকগুলির সাথে সারিবদ্ধ হয় তা নিশ্চিত করে৷ Luer সংযোগকারী বা ক্ল্যাম্প ফিটিং ব্যবহার করে সংযোগ করুন।

5.1.2 খাঁড়ি প্রবাহের হার 5-10 MV/মিনিট সেট করুন এবং বায়ু পরিষ্কার করতে ভারসাম্য বাফার ব্যবহার করুন৷ আউটলেটে কোন বুদবুদ না দেখা পর্যন্ত ফ্লাশিং চালিয়ে যান, তারপর পারমিট আউটলেটটিকে ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেমের সাথে সংযুক্ত করুন

5.2:চিকিত্সা ব্যবহার করার আগে-

5.2.1: ইনলেট প্রবাহের হার 5-10 MV/মিনিট সেট করুন এবং ঝিল্লি যাতে ভারসাম্য বজায় রাখে তা নিশ্চিত করতে 5 MV-এর বেশি 0.5 M NaOH দিয়ে প্রি-চিকিত্সা করুন৷

5.2.2: একই প্রবাহ হারের অধীনে, ঝিল্লি যাতে ভারসাম্য বজায় রাখে তা নিশ্চিত করার জন্য 5 MV-এর বেশি ভারসাম্য বাফার (1× PBS) দিয়ে আরও প্রি-চিকিৎসা করুন৷

5.3 ক্রোমাটোগ্রাফি প্রক্রিয়া

5.3.1

ইনলেট প্রবাহের হার 5-10 MV/মিনিট সেট করুন এবং মেমব্রেন ভারসাম্য না পৌঁছানো পর্যন্ত 5 MV-এর বেশি ভারসাম্য বাফার দিয়ে প্রি-চিকিৎসা করুন৷

5.3.2

নমুনাটি 0.22 μm ফিল্টারের মাধ্যমে আগে থেকে-ফিল্টার করার পরে, লোডিং সম্পূর্ণ না হওয়া পর্যন্ত বা ক্রোমাটোগ্রাফি লোডিং ক্ষমতায় না পৌঁছানো পর্যন্ত নমুনাটি লোড করুন৷

5.3.3

UV শোষণ বেসলাইন স্তরে হ্রাস না হওয়া পর্যন্ত 10 MV-এর বেশি জন্য ভারসাম্য বাফার দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।

5.3.4

প্রক্রিয়া নকশা অনুযায়ী গ্রেডিয়েন্ট ইলিউশন বা রৈখিক ইলিউশন ব্যবহার করুন এবং প্রয়োজন অনুযায়ী ভগ্নাংশে নমুনা সংগ্রহ করুন।

5.4,সিআইপি পোস্ট-চিকিৎসা ব্যবহার করুন – মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ডিভাইসের সিআইপি

5.4.1

ইনলেট প্রবাহের হার 5-10 MV/মিনিটে সেট করুন এবং UV শোষণ বেসলাইনের নীচে না যাওয়া পর্যন্ত 0.5 M NaOH দিয়ে 0.5 M NaOH দিয়ে পরিস্কার-ইন-স্থানে (CIP) চিকিত্সা করুন।

5.4.2

30 মিনিটের জন্য ধোয়ার সঞ্চালন করার পরে, পিএইচ 7-8 এর মধ্যে না হওয়া পর্যন্ত জল ধোয়াতে স্যুইচ করুন, তারপর পরিবাহিতা প্রায় স্থির না হওয়া পর্যন্ত 20% ইথানল দিয়ে পরিষ্কার করা চালিয়ে যান।

5.5, মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি স্টোরেজ:

সিআইপি ব্যবহার এবং সমাপ্তির পরে, ঝিল্লি মডিউলটি 20% ইথানলে ভিজিয়ে সরিয়ে এবং 20% ইথানল দ্রবণে ঘরের তাপমাত্রায় অনলাইনে সংরক্ষণ করা যেতে পারে। 20% ইথানল দ্রবণ পর্যায়ক্রমে পরিদর্শন এবং প্রতিস্থাপন করা উচিত।

 

6.অর্ডারিং তথ্য

DEAE-টাইপ দুর্বল অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি ক্যাপসুল ফিল্টার

	ল্যাবরেটরি-স্কেল	ছোট স্কেল	পাইলট স্কেল	উৎপাদন স্কেল
পণ্য মডেল	IEXD0002ES	IEXD0050ES	IEXD0400ES	IEXD5000ES
ঝিল্লি ভলিউম	0.2 মিলি	5 মিলি	400 মিলি	5L

গরম ট্যাগ: deae দুর্বল anion বিনিময় ঝিল্লি ক্রোমাটোগ্রাফি, চীন, সরবরাহকারী, নির্মাতারা, কারখানা, পাইকারি, বাল্ক, স্টক, বিনামূল্যে নমুনা